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福彩福建快三开奖结果查询今天开奖结果查询结果:荧光定量PCR仪如何选择?

2019-12-11浏览量:175编辑:来源:

福建快三75推荐 www.ilbtn.com 实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正?;砝疵植贡尘坝獾牟钜?。正?;罂梢陨瓒ㄓ蛑邓?,这就是分析荧光数据的水平。

朗基荧光定量PCR仪


那如何选择荧光定量PCR仪器呢,可以从以下几个方面着手:

1、仪器使用的广泛程度

  如果不是一个新出现的仪器品牌,为保证所购置的仪器有充分的可靠性,临床PCR实验室可以从相应仪器在国内外使用的广泛程度来判断。应用越是广泛的仪器,越是经过实践验证的,也就越具有可靠性。
2、仪器的检测通量(反应孔数)
  在购买定量PCR仪的时候需要根据实验室的要求来选择不同通量的仪器。目前市面上的荧光定量PCR仪的检测通量小到16多到384孔,实验室可以根据自己的检测项目和发展状况,选择合适的仪器,没必要追求最昂贵的仪器,一般来说,96孔的通量足够用了;如需寻找新药靶点和疾病标记等类型的实验,则可以考虑购买384孔的仪器。
3、仪器的通道数量
  随着医院开展的项目越来越多,比如基因表达,单核苷酸多态性分析、高分辨率熔解曲线等,那么单通道的仪器则无法满足实验室的需求了,而多通道的设计则能使其更方便地检测多重PCR检测及其衍生的基因表达等其他分析模式。
4、耗材的开放性
  耗材如扩增反应管的开放性可能会决定日常检测成本的高低。作为临床PCR实验室,在选择实时荧光PCR仪时,可考虑这一点。不过对于检测HCV等RNA项目的时候,尽量使用去RNAnase酶耗材。
5、硬件设计特点
  荧光定量PCR仪主要有96孔板式和离心式等,每种设计都有它的独到之处,但也都有无法避免的缺陷。
  96孔板的荧光定量PCR仪可以容纳的样本量大,最大可至100ul,而且无需特殊的耗材。传统的96孔板仪器多采用卤钨灯激发、CCD检测。其优点在于:卤钨灯的光强比LED灯强,波长范围广,对于荧光染料的激发具有非常好的效果,性能比较稳定,使用寿命约3000个小时左右;但CCD的检测通?;嵋蛭扛鲅房拙喙庠春图觳馄鞯墓獬谈鞑幌嗤?,会产生边缘效应,对结果产生一定的影响。为了保证精确、精准的实验结果,这类仪器在实验过程中通常需要配合ROX校正染料,来平衡孔间差异;
离心式的仪器通常选用LED激发、PMT检测,设计上避免了边缘效应,同时PMT检测对荧光信号可以放大或缩小,相对于CCD检测更加灵活,灵敏度更高;但LED的荧光强度比较弱,波长范围也比较窄,因此,对荧光染料的激发效果不如卤钨灯;
6、运行速度
  在荧光定量PCR仪的众多技术参数中,升降温速度也是非常重要的。更快的升降温,可以缩短反应进行的时间,而且缩短了可能的非特异性结合和反应时间,提高PCR的特异性。但是,运行速度越快,对加热制冷??榈囊笤礁?,因此,稳定性是其存在的最大问题,如果在市面上经过长期考证的,稳定性好的仪器,运行速度越快,带来的便捷越多;
7、灵活性

  在仪器基本性能得到保证的情况下,另外一方面则需要考虑仪器的灵活性,主要包括:仪器运输的灵活性,拆卸的灵活性,软件升级的灵活性,??楦坏牧榛钚砸约笆褂玫牧榛钚缘?。



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